一、如何區(qū)(qū)分不同級(jí)(jí)別的生物安全柜？

生物安全柜是為操作原代培養(yǎng)(yǎng)物、菌毒株以及診斷性標(biāo)(biāo)本等具有感染性的實(shí)(shí)驗(yàn)(yàn)材料時(shí)(shí)，用來(lái)保護(hù)(hù)操作者本人、實(shí)(shí)驗(yàn)(yàn)室環(huán)(huán)境以及實(shí)(shí)驗(yàn)(yàn)材料，使其避免暴露于上述操作過(guò)程中可能產(chǎn)(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設(shè)(shè)計(jì)(jì)的。

生物安全柜可分為Ⅰ級(jí)(jí)、Ⅱ級(jí)(jí)、Ⅲ級(jí)(jí)。

Ⅰ級(jí)(jí)生物安全柜可保護(hù)(hù)工作人員和環(huán)(huán)境而不保護(hù)(hù)樣品。氣流原理和實(shí)(shí)驗(yàn)(yàn)室通風(fēng)(fēng)櫥一樣，不同之處在于排氣口安裝有HEPA過(guò)濾器。一級(jí)(jí)生物安全柜本身無(wú)風(fēng)(fēng)機(jī)(jī)。Ⅱ級(jí)(jí)生物安全柜是目前應(yīng)(yīng)用最為廣泛的柜型。 與Ⅰ級(jí)(jí)生物安全柜一樣，Ⅱ級(jí)(jí)生物安全柜也有氣流流入前窗開(kāi)口，被稱作“進(jìn)(jìn)氣流”，用來(lái)防止在微生物操作時(shí)(shí)可能生成的氣溶膠從前窗逃逸。與Ⅰ級(jí)(jí)生物安全柜不同的是，未經(jīng)(jīng)過(guò)濾的進(jìn)(jìn)氣流會(huì)(huì)在到達(dá)(dá)工作區(qū)(qū)域前被進(jìn)(jìn)風(fēng)(fēng)格柵俘獲，因此試驗(yàn)(yàn)品不會(huì)(huì)受到外界空氣的污染。

Ⅱ級(jí)(jí)生物安全柜的一個(gè)(gè)獨(dú)(dú)te之處在于經(jīng)(jīng)過(guò)HEPA過(guò)濾器過(guò)濾的垂直層流氣流從安全柜頂部吹下，被稱作“下沉氣流”。下沉氣流不斷吹過(guò)安全柜工作區(qū)(qū)域，以保護(hù)(hù)柜中的試驗(yàn)(yàn)品不被外界塵埃或細(xì)(xì)菌污染。因此，所有的Ⅱ級(jí)(jí)生物安全柜都可提供工作人員、環(huán)(huán)境和產(chǎn)(chǎn)品的保護(hù)(hù)。

Ⅲ級(jí)(jí)生物安全柜是為4級(jí)(jí)實(shí)(shí)驗(yàn)(yàn)室生物安全等級(jí)(jí)而設(shè)(shè)計(jì)(jì)的，是目前世界上zui高安全防護(hù)(hù)等級(jí)(jí)的安全柜。柜體完quan氣密，100%全排放式，所有氣體不參與循環(huán)(huán)，工作人員通過(guò)連接在柜體的手套進(jìn)(jìn)行操作，俗稱手套箱(Golve box)，試驗(yàn)(yàn)品通過(guò)雙門(mén)的傳遞箱進(jìn)(jìn)出安全柜以確保不受污染，適用于高風(fēng)(fēng)險(xiǎn)(xiǎn)的生物試驗(yàn)(yàn)。

二、Ⅱ級(jí)(jí)生物安全柜的分類及選型有哪些？

Ⅱ級(jí)(jí)生物安全柜按排放氣流占系統(tǒng)(tǒng)總流量的比例及內(nèi)(nèi)部設(shè)(shè)計(jì)(jì)結(jié)(jié)構(gòu)(gòu)，將其劃分為A1、A2、B1、B2四個(gè)(gè)類型。

A1型安全柜前窗氣流速度最小量或測(cè)(cè)量平均值應(yīng)(yīng)至少為0.4m/s。安全柜內(nèi)(nèi)70%氣體通過(guò)高效空氣過(guò)濾器過(guò)濾后再循環(huán)(huán)至工作區(qū)(qū)，30%氣體通過(guò)排氣口的高效空氣過(guò)濾器排出。安全柜內(nèi)(nèi)的污染氣流經(jīng)(jīng)過(guò)高效空氣過(guò)濾器過(guò)濾后可以排到實(shí)(shí)驗(yàn)(yàn)室或經(jīng)(jīng)安全柜的外排接口通過(guò)排風(fēng)(fēng)管道排到大氣中。

A2型安全柜前窗氣流速度最小量或測(cè)(cè)量平均值應(yīng)(yīng)至少為0.5m/s。70%氣體通過(guò)HEPA過(guò)濾器再循環(huán)(huán)至工作區(qū)(qū)，30%的氣體通過(guò)排氣口過(guò)濾排除。安全柜內(nèi)(nèi)的污染氣流經(jīng)(jīng)過(guò)高效空氣過(guò)濾器過(guò)濾后可以排到實(shí)(shí)驗(yàn)(yàn)室或經(jīng)(jīng)安全柜的外排接口通過(guò)排風(fēng)(fēng)管道排到大氣中。安全柜的負(fù)(fù)壓環(huán)(huán)繞污染區(qū)(qū)域的設(shè)(shè)計(jì)(jì)，阻止了柜內(nèi)(nèi)物質(zhì)(zhì)的泄漏。

B1型生物安全柜前窗操作口流入氣流的zui低流速為0.50m/s，柜內(nèi)(nèi)氣體中30%氣體通過(guò)高效空氣過(guò)濾器過(guò)濾后再循環(huán)(huán)使用，70%氣體通過(guò)排氣口HEPA過(guò)濾器過(guò)濾后通過(guò)專用風(fēng)(fēng)道排入大氣中。所有被生物污染的部位均應(yīng)(yīng)保持負(fù)(fù)壓，或被負(fù)(fù)壓的通道和負(fù)(fù)壓通風(fēng)(fēng)系統(tǒng)(tǒng)包圍。

B2型生物安全柜前窗操作口流入氣流的zui低流速為0.5m/s，柜內(nèi)(nèi)下降氣流全部是由柜外供給，即安全柜排出的氣體不再循環(huán)(huán)使用。柜內(nèi)(nèi)的氣流經(jīng)(jīng)過(guò)濾后排入大氣，不允許再進(jìn)(jìn)入安全柜循環(huán)(huán)或返流回實(shí)(shí)驗(yàn)(yàn)室，可同時(shí)(shí)提供生物性和化學(xué)(xué)性的安全控制。所有污染部位均應(yīng)(yīng)處于負(fù)(fù)壓狀態(tài)(tài)或者被負(fù)(fù)壓區(qū)(qū)包圍。

三、生物安全柜檢測(cè)(cè)依據(jù)(jù)什么標(biāo)(biāo)準(zhǔn)(zhǔn)？

生物安全柜檢測(cè)(cè)現(xiàn)(xiàn)行的主要標(biāo)(biāo)準(zhǔn)(zhǔn)依據(jù)(jù)有：

（1）歐盟EN 12469：2000《Biotechnology-Peformance Criteria for Microbiological Safety Cabinets》

（2）美國(guó)(guó)NSF/ANSI 49—2002《Class II(Laminar Flow) Biosafety Cabinetry》；

（3）JG 170-2005中華人民共和國(guó)(guó)建筑工業(yè)(yè)行業(yè)(yè)標(biāo)(biāo)準(zhǔn)(zhǔn)《生物安全柜》；

（4）YY 0569-2011中華人民共和國(guó)(guó)醫(yī)(yī)藥行業(yè)(yè)標(biāo)(biāo)準(zhǔn)(zhǔn)《Ⅱ級(jí)(jí)生物安全柜》。

鑒于生物安全柜危險(xiǎn)(xiǎn)的使用環(huán)(huán)境，在安裝時(shí)(shí)以及以后每隔一定時(shí)(shí)間，要由具有CMA檢測(cè)(cè)資質(zhì)(zhì)與能力的第三方檢驗(yàn)(yàn)檢測(cè)(cè)機(jī)(jī)構(gòu)(gòu)按照規(guī)(guī)定對(duì)(duì)每一臺(tái)(tái)生物安全柜的整體運(yùn)(yùn)行性能進(jìn)(jìn)行性能檢測(cè)(cè)，以檢查其是否符合國(guó)(guó)家及國(guó)(guó)際的性能標(biāo)(biāo)準(zhǔn)(zhǔn)保證使用者的安全。

四、生物安全柜檢測(cè)(cè)主要檢測(cè)(cè)哪些指標(biāo)(biāo)？

生物安全柜檢測(cè)(cè)主要包括物理學(xué)(xué)檢測(cè)(cè)和生物學(xué)(xué)檢測(cè)(cè)兩個(gè)(gè)方面，根據(jù)(jù)檢測(cè)(cè)性質(zhì)(zhì)可分為首ci檢測(cè)(cè)、后續(xù)(xù)檢測(cè)(cè)。除生物安全柜的一年一度的常規(guī)(guī)檢測(cè)(cè)外，下列情況之一時(shí)(shí)，如安裝后、移動(dòng)(dòng)后、檢修后、更換過(guò)濾器后，也必須進(jìn)(jìn)行現(xiàn)(xiàn)場(chǎng)(chǎng)生物安全柜檢測(cè)(cè)。

按照《Ⅱ級(jí)(jí)生物安全柜》（YY0569-2015）、《生物安全柜》（JG170-2005）和《消毒技術(shù)(shù)規(guī)(guī)范》（2002年版）要求，Ⅱ級(jí)(jí)生物安全柜檢測(cè)(cè)指標(biāo)(biāo)包括高效過(guò)濾器檢漏、潔凈度、下降氣流流速、工作窗口進(jìn)(jìn)口平均風(fēng)(fēng)速、溫升、氣體流向、照度、噪聲、振幅、紫外線燈強(qiáng)(qiáng)度。安裝后、移動(dòng)(dòng)后、檢修后、更換過(guò)濾器后還必須加測(cè)(cè)柜檢漏和人員安全性、受度樣本安全性和交叉感染。Ⅲ級(jí)(jí)生物安全柜還須檢測(cè)(cè)靜壓差。

五、使用生物安全柜有哪些注意事項(xiàng)(xiàng)？

（1）超凈工作臺(tái)(tái)≠生物安全柜。超凈工作臺(tái)(tái)看似和生物安全柜非常相似，但超凈工作臺(tái)(tái)只保護(hù)(hù)工作區(qū)(qū)的樣品免受外部環(huán)(huán)境污染，并不能保護(hù)(hù)操作人員。

（2）請(qǐng)(qǐng)勿使用生物安全柜處理有毒、易燃、易爆等材料。

（3）應(yīng)(yīng)避免使用明火。因明火產(chǎn)(chǎn)生的熱效應(yīng)(yīng)會(huì)(huì)干擾生物安全柜操作區(qū)(qū)內(nèi)(nèi)的氣流穩(wěn)(wěn)定，且火焰熱氣會(huì)(huì)影響濾器的壽命。如必須使用，可根據(jù)(jù)需要選取即用即燃式滅菌器具或微型接觸式燃燒器。

（4）請(qǐng)(qǐng)勿在生物安全柜內(nèi)(nèi)擺放過(guò)多物品，否則會(huì)(huì)影響安全柜氣流和安全性能。

（5）合理選擇生物安全柜的安裝地點(diǎn)(diǎn)。應(yīng)(yīng)當(dāng)(dāng)盡量遠(yuǎn)(yuǎn)離外部氣流干擾因素，例如門(mén)窗、空調(diào)(diào)通風(fēng)(fēng)口、人員過(guò)道以及其他實(shí)(shí)驗(yàn)(yàn)室氣流干擾設(shè)(shè)備（安全柜、通風(fēng)(fēng)櫥等）。

（6）生物安全柜中一般不需要紫外燈。如果使用紫外燈的話，應(yīng)(yīng)該每周進(jìn)(jìn)行清潔，以除去可能影響其殺菌效果的灰塵和污垢。

（7）在安全柜使用前后，請(qǐng)(qǐng)按照程序?yàn)榘踩襁M(jìn)(jìn)行表面除菌。使用適當(dāng)(dāng)?shù)南緞?/span>70%的異丙醇溶劑擦拭安全柜的工作區(qū)(qū)表面，包括前后的近期格柵。

（8）注意安全柜自凈周期。開(kāi)啟關(guān)(guān)閉安全柜時(shí)(shí)，讓安全柜自主運(yùn)(yùn)行3-5分鐘的自凈周期。這個(gè)(gè)自凈程序可以清除安全柜的工作區(qū)(qū)域內(nèi)(nèi)可能存在的經(jīng)(jīng)空氣傳播的污染物。

（9）確保安全柜在工作時(shí)(shí)前窗處于正確的額定操作高度。

（10）正確著裝為操作中提供必要保護(hù)(hù)。當(dāng)(dāng)進(jìn)(jìn)行高危險(xiǎn)(xiǎn)性操作，例如生物安全水平2+到3級(jí)(jí)操作時(shí)(shí)，應(yīng)(yīng)選用長(zhǎng)(zhǎng)袖、背面開(kāi)口的隔離衣和兩副手套，并確保外層手套套住隔離衣袖口。不能有暴露在外的肌膚。

（11）在安全區(qū)(qū)域內(nèi)(nèi)進(jìn)(jìn)行操作。切勿阻塞工作區(qū)(qū)前后的通風(fēng)(fēng)格柵。盡量在工作區(qū)(qū)的中心部位進(jìn)(jìn)行操作。

（12）遵循清潔區(qū)(qū)到污染區(qū)(qū)的操作原則。生物安全柜的工作區(qū)(qū)應(yīng)(yīng)該被依次劃分為三個(gè)(gè)區(qū)(qū)域：清潔區(qū)(qū)、工作區(qū)(qū)和污染區(qū)(qū)。生物危害性廢棄物袋應(yīng)(yīng)放置在污染區(qū)(qū)內(nèi)(nèi)；實(shí)(shí)驗(yàn)(yàn)儀器和樣品應(yīng)(yīng)放置在工作區(qū)(qū)域；而實(shí)(shí)驗(yàn)(yàn)供給品應(yīng)(yīng)放置在潔凈區(qū)(qū)內(nèi)(nèi)。在工作臺(tái)(tái)面上的實(shí)(shí)驗(yàn)(yàn)操作應(yīng)(yīng)該按照從清潔區(qū)(qū)到污染區(qū)(qū)的方向進(jìn)(jìn)行。

六、如何判斷高效過(guò)濾器需要更換?

（1）風(fēng)(fēng)速變小。當(dāng)(dāng)檢測(cè)(cè)發(fā)(fā)現(xiàn)(xiàn)潔凈度指標(biāo)(biāo)正常、下降氣流或流入氣流流速變小時(shí)(shí)；或者設(shè)(shè)備在運(yùn)(yùn)行過(guò)程中，若設(shè)(shè)備發(fā)(fā)出聲光報(bào)(bào)警且是因下降氣流或流入氣流流速低造成的(顯示窗口分別所顯示數(shù)(shù)值低于設(shè)(shè)計(jì)(jì)要求)說(shuō)明過(guò)濾器堵塞己十分嚴(yán)(yán)重，風(fēng)(fēng)機(jī)(jī)轉(zhuǎn)(zhuǎn)速己達(dá)(dá)到最大值，系統(tǒng)(tǒng)無(wú)論如何調(diào)(diào)整都無(wú)法達(dá)(dá)到規(guī)(guī)定的風(fēng)(fēng)速值，此時(shí)(shí)必須更換過(guò)濾器。

（2）壓力傳感器報(bào)(bào)警。當(dāng)(dāng)壓力指示器顯示值大于170Pa時(shí)(shí)報(bào)(bào)警系統(tǒng)(tǒng)報(bào)(bào)警。

（3）檢測(cè)(cè)高效過(guò)濾器完整性發(fā)(fā)現(xiàn)(xiàn)有泄漏。

（4）氣流模式改變時(shí)(shí)。通過(guò)檢測(cè)(cè)發(fā)(fā)現(xiàn)(xiàn)，垂直氣流（下降氣流）出現(xiàn)(xiàn)死角和回流，有煙霧從柜內(nèi)(nèi)泄漏出來(lái)，或進(jìn)(jìn)入柜內(nèi)(nèi)的煙霧有外逸時(shí)(shí)。

（5）控制面板上的風(fēng)(fēng)機(jī)(jī)累計(jì)(jì)運(yùn)(yùn)行時(shí)(shí)間，如果達(dá)(dá)到10000小時(shí)(shí)，通常需要更換過(guò)濾器，但不是必須更換，還要考慮使用環(huán)(huán)境的潔凈程度，使用習(xí)(xí)慣等。